Vancomycin Hydroclorid

Vancomycini hydrochloridum

 

 

C₆₆H₇₅Cl₂N₉O₂₄. HCl                                                                                                P.t.l: 1486,0

Vancomycin hydroclorid laø muoái hydroclorid cuûa hoãn hôïp caùc glycopeptid coù lieân quan vôùi nhau, chuû yeáu döôùi daïng mono hydroclorid cuûa (3S,6R,7R,22R,23S,26S,aS,36R,38aR)-3-(2-amino-2-oxoethyl)-44-[[2-O-(3-amino-2,3,6-trideoxy-3-C-methyl-a-L-lyxo-hexopyranosyl)-b-D-glucopyra-nosyl]oxy]-10,19-dicloro-7,22,28,30,32-pentahydroxy-6-[[(2R)-4-methyl-2-(methylamino)penta-noyl]amino]-2,5,24,38,39-pentaoxo-2,3,4,5,6,7,23,24,25,26,36,37,38,38a-tetradecahydro-22H-8, 11,18,21-dietheno-23,36-(iminomethano)-13,16:31,35-dimetheno-1H,13H-[1,6,9]oxadiazacyclo-hexadecino[4,5-m][10,2,16]benzoxadiazacyclotetracosin-26-carboxylic acid (vancomycin B). Vancomycin hydroclorid ñöôïc ñieàu cheá töø moät soá loaøi Amycolaptosis orientalis hoaëc baèng phöông caùch khaùc. Hoaït löïc khoâng ñöôïc ít hôn 1050 IU/mg, tính theo cheá phaåm ñaõ laøm khoâ.

Tính chaát

Boät traéng hoaêc gaàn nhö traéng, deã huùt aåm. Deã tan trong nöôùc, khoù tan trong ethanol 96%.

Ñònh tính

A.   Kieåm tra saéc kyù ñoà thu ñöôïc trong pheùp thöû giôùi haïn vancomycin B. Thôøi gian löu cuûa pic chính trong saéc kyù ñoà thu ñöôïc töø dung dòch thöû (1) töông ñöông vôùi thôøi gian löu cuûa pic chính treân saéc kyù ñoà cuûa dung dòch ñoái chieáu.

B.   Cheá phaåm phaûi cho phaûn öùng A cuûa pheùp thöû ñònh tính ion clorid (Phuï luïc 8.1)

Ñoä trong vaø maøu saéc cuûa dung dòch

Hoøa tan 2,5 g cheá phaåm trong nöôùc vaø pha loaõng thaønh 25 ml vôùi cuøng dung moâi. Dung dòch thu ñöôïc phaûi trong (Phuï luïc 9.2). Ñoä haáp thụ (Phuï luïc 4.1) cuûa dung dòch treân ño ôû böôùc soùng 450 nm khoâng ñöôïc lôùn hôn 0,10.

pH

Hoøa tan 0,50 g cheá phaåm trong nöôùc khoâng coù carbon dioxyd (TT) vaø pha loaõng thaønh 10 ml vôùi cuøng dung moâi. pH cuûa dung dòch phaûi töø 2,5 ñeán 4,5 (Phuï luïc 6.2).

Vancomycin B

Khoâng ñöôïc ít hôn 93,0%

Xaùc ñònh baèng phöông phaùp saéc kyù loûng (Phuï luïc 5.3).

Pha ñoäng A: Theâm 1996 ml nöôùc vaøo 4,0 ml triethylamin (TT) vaø chænh pH ñeán 3,2 vôùi acid phosphoric (TT). Laáy 920 ml dung dòch vöøa pha, theâm 10 ml tetrahydrofuran (TT) vaø 70 ml acetonitril (TT).

Pha ñoäng B: Theâm 1996 ml nöôùc vaøo 4,0 ml triethylamin (TT) vaø chænh pH ñeán 3,2 vôùi acid phosphoric (TT). Laáy 700 ml dung dòch vöøa pha, theâm 10 ml tetrahydrofuran (TT) vaø 290 ml acetonitril (TT).

Dung dòch thöû (1): Hoøa tan 10,0 mg cheá phaåm trong pha ñoäng A vaø pha loaõng thaønh 5,0 ml vôùi cuøng dung moâi.

Dung dòch thöû (2): Pha loaõng 2,0 ml dung dòch thöû (1) thaønh 50,0 ml baèng pha ñoäng A.

Dung dòch thöû (3): Pha loaõng 0,5 ml dung dòch thöû (2) thaønh 20,0 ml baèng pha ñoäng A.

Dung dòch ñoái chieáu: Hoøa tan 5,0 mg vancomycin hydroclorid chuaån (ÑC) trong 4 ml nöôùc vaø pha loaõng thaønh 10 ml vôùi cuøng dung moâi. Ñun noùng ôû 65 ^oC trong 24 giôø. Ñeå nguoäi.

Duøng caùc dung dòch naøy trong voøng 4 giôø sau khi pha cheá.

Ñieàu kieän saéc kyù:

Coät: coät theùp khoâng ræ (0,25m x 4,6 mm), được nhoài pha tĩnh C (5 µm).

Toác ñoä doøng: 1,0 ml/phuùt.

Detector quang phoå hấp thu tử ngoại ñaët böôùc soùng ôû 280 nm.

Theå tích tieâm maãu: 20 µl.

Cách tiến hành:

Röûa giải coät khôûi ñaàu vôùi pha ñoäng A. Sau 13 phuùt, tiến haønh röûa giải gradient taêng daàn noàng ñoä pha ñoäng B khoaûng 11 % v/v cho moãi phuùt. Cuoái cuøng, röûa giải coät trong 4 phuùt, bằng pha ñoäng B.

Tieâm dung dòch thöû (3). Pheùp thöû chæ coù giaù trò khi pic chính trong saéc kyù ñoà thu ñöôïc coù giaù trò tæ soá tín hiệu nhiễu/ñường nền nhoû nhaát laø 5. Tieâm dung dòch thöû (2). Pheùp thöû naøy chæ coù giaù trò khi heä soá ñoái xöùng cuûa pic vancomycin toái ña laø 1,6. Tieâm dung dòch ñoái chieáu. Pheùp thöû naøy chæ coù giaù trò khi ñoä phaân giaûi giöõa 2 pic chính ít nhaát laø 5,0. Tieâm dung dòch thöû (1).

Tính keát quaû haøm löôïng phaàn traêm vancomycin B hydroclorid theo coâng thöùc sau:

A_b = dieän tích pic vancomycin B trong saéc kyù ñoà cuûa dung dòch thöû (2),

A_t = toång dieän tích taát caû caùc pic taïp chaát trong saéc kyù ñoà cuûa dung dòch thöû (1)

Taïp chaát lieân quan

Kieåm tra baèng saéc kyù loûng (Phuï luïc 5.3), nhö moâ taû trong thöû nghieäm vancomycin B.

Tieâm rieâng reõ dung dòch thöû (1), dung dòch thöû (2) vaø dung dòch thöû (3).

Tính haøm löôïng phaàn traêm cho moãi taïp chaát baèng coâng thöùc sau:

 

Ai = Dieän tích pic cuûa taïp chaát treân saéc kyù ñoà thu ñöôïc töø dung dòch thöû (1),

A_b = Dieän tích pic vancomycin B trong saéc kyù ñoà thu ñöôïc töø dung dòch thöû (2),

A_t = Toång dieän tích taát caû caùc pic taïp chaát trong saéc kyù ñoà thu ñöôïc töø dung dòch thöû (1)

Haøm löôïng caùc chaát khoâng phaûi laø caùc taïp chaát nhö moâ taû phaûi lôùn hôn 4,0 % vaø haøm löôïng taïp chaát toaøn phaàn khoâng ñöôïc nhieàu hôn 7,0 %. Khoâng tính ñeán nhöõng pic coù dieän tích nhoû hôn dieän tích pic chính trong saéc kyù ñoà cuûa dung dòch thöû (3).

Kim loaïi naëng

Khoâng ñöôïc quaù 30 phaàn trieäu (Phuï luïc 9.4.8). Duøng 1,0 g cheá phaåm thöû theo phöông phaùp 3.

Duøng 3,0 ml dung dòch chì maãu 10 phaàn trieäu (TT) ñeå chuaån bò maãu ñoái chieáu.

Nöôùc

Khoâng ñöôïc quaù 5,0 % (Phuï luïc 10.3).

Duøng 0,5 g cheá phaåm tieán haønh thöû baèng phöông phaùp baùn vi ñònh löôïng.

Tro sulfat

Khoâng ñöôïc quaù 1,0 % (Phuï luïc 9.9).

Duøng 1,0 g cheá phaåm.

Ñoä voâ truøng

Neáu cheá phaåm döï ñònh duøng laøm nguyeân lieäu ñeå baøo cheá thuoác tieâm maø khoâng coù giai ñoaïn tieät truøng trong qui trình saûn xuaát, cheá phaåm phaûi ñaït chæ tieâu veà ñoä voâ truøng (Phuï luïc 15.4).

Noäi ñoäc toá vi khuaån

Khoâng ñöôïc quaù 0,25 IU/mg (Phuï luïc 13.2). Neáu döï ñònh duøng laøm nguyeân lieäu ñeå baøo cheá thuoác tieâm phaân lieàu maø khoâng coù giai ñoaïn loaïi boû noäi ñoäc toá vi khuaån thích hôïp trong qui trình saûn xuaát, cheá phaåm phaûi ñaït chæ tieâu veà noäi ñoäc toá vi khuaån.

Ñònh löôïng

Tieán haønh theo phöông phaùp xaùc ñònh hoaït löïc khaùng sinh baèng phöông phaùp thöû vi sinh vaät (Phuï luïc 13.9). Duøng vancomycin hydroclorid chuaån (ÑC) laøm chaát ñoái chieáu.

Baûo quaûn

Baûo quaûn trong chai loï kín, traùnh aùnh saùng. Neáu ñaõ ñöôïc tieät truøng tröôùc, phaûi baûo quaûn trong chai loï kín vaø voâ truøng.

Nhaõn

Nhaõn ghi roõ cheá phaåm ñaõ ñöôïc tieät truøng, khoâng coù noäi ñoäc toá vi khuaån.

Taùc duïng

Khaùng khuaån.

Cheá phaåm

Thuốc tieâm, vieân nang.